Sûnens, Medicine
Ksantoproteinovaya reaksje nei protein: tekens en formule fergeliking
Om fêst te stellen de kwalitative gearstalling fan in protte Foods brûkt ksantoproteinovaya reaksje oan it aaiwyt. De oanwêzigens fan aromatisch aminosoeren yn 'e miks sil feroarje yn in positive test sample kleur.
Wat is protein
It wurdt ek neamd in aaiwyt, dat is in gebou materiaal foar de libbene lichem. Aaiwiten hanthavenje muscle grutte, werstelle jo de ferwûne en deade weefsel struktueren fan ferskate organen, wêze it hier, hûd en LIGAMENTS. Mei harren partisipaasje, produsearret read bloed lichemkes, wurdt regele troch de normale wurking fan in soad hormoanen en ymmúnsysteem sellen.
Dit is in komplekse molecule dat is in polypeptide it hawwen fan in massa grutter as 6 ~ 10 3 Daltons. Protein struktuer foarming amino acid resten yn in grut oantal keppele peptide obligaasje.
De struktuer fan de aaiwiten
It ûnderskiedende skaaimerk fan dizze stoffen fergelike mei lege molekulêre gewicht peptiden is dat sy ûntwikkele in trijediminsjonale romtlike struktuer, stipe effekten mei wikseljend attraksje. Aaiwiten besitte fjouwer-struktuer. Foar elk fan harren hat syn eigen skaaimerken.
As de basis fan 'e primêre organisaasje fan de molekulen ôfkomstige amino acid sequence, struktuer dy't erkent ksantoproteinovaya reaksje oan it aaiwyt. Dizze struktuer is in periodyk repeating peptide bond -HN-CH-mei-, in selektyf diel radikalen binne de kant keatlingen yn aminosoeren. Se define fierdere eigenskippen fan de stof as gehiel.
De primêre protein struktuer wurdt beskôge sterk genôch, dat is fanwege de oanwêzigens fan sterke covalent ynteraksjes yn peptide obligaasjes. De foarming fan lettere nivo komt ôfhinklik fan de attributen ynsteld yn de earste etappe.
De foarming fan it fuortset struktuer is mooglik fanwege draaien fan 'e amino acid folchoarder yn in spiraal, dêr't hydrogen obligaasjes wurde fêstlein tusken de bochten.
Tertiary nivo organisaasje fan molekulen foarme troch it oanbringen fan ien fan in spiraalfoarm oan 'e oare fragminten mei it optreden fan alle mooglike ferbinings tusken harren, mei wetterstof, disulfide, covalent of ioanyske gearsetting. It resultaat is de feriening yn 'e foarm fan globules.
De romtlike oardering fan 'e tsjinstesektor struktueren mei de foarming fan gemyske biningen tusken harren liedt ta de foarming fan de definitive foarm fan it molekúl of quaternary nivo.
aminosoeren
Se feroarsaakje de gemyske eigenskippen fan aaiwiten. Der binne sa'n 20 grutte aminosoeren wêrtroch de polypeptides yn in oare folchoarder. Dat ek wurdt ferwiisd seldsume aminocarboxylic soer yn de foarm hydroxyproline en hydroxylysine ûntliende basis peptide.
As teken fan werkenning ksantoproteinovaya eiwit reaksje, de oanwêzigens fan bepaalde aminosoeren jout de kleur feroaring fan reagents, sizze de oanwêzigens fan spesifike struktueren yn harren gearstalling.
Sa die bliken út, se binne carboxylic soeren dy't hawwe plakfûn wikselje wetterstof atoom op de amino groep.
In foarbyld struktuur fan de molecule kin tsjinje in strukturele formule glycine (HNH- HCH- COOH) as de simpelste amino acid.
Yn dat gefal ien fan de hydrogens CH 2 - meie wurde ferfongen troch in koalstof langer radikaal besteande út in benzene ring, amino, sulfo, carboxy.
Wat docht ksantoproteinovaya reaksje
Foar kwalitative analyze fan aaiwiten mei help fan ferskate techniken. Dy befetsje reaksjes:
- biuret mei it uterlik fan Violet kleur;
- ninhydrin te foarmje in blau-violet oplossing;
- formaldehyde mei de festiging fan in reade kleur;
- Nogier te neerslag de grize-swarte kleur.
By de útfiering fan elk metoade bewiisde de oanwêzichheid fan aaiwiten en de oanwêzigens fan bepaalde funksjonele groepen yn harren molecule.
Der ksantoproteinovaya reaksje oan it aaiwyt. It wurdt ek wol de ôfbraak Mulder. It ferwiist nei de kleur reaksjes foar aaiwiten, dêr't der binne aromatisch en heterocyclic aminosoeren.
In skaaimerk fan sa'n stekproef proses is nitration acid nitric Cyclische amino acid resten yn it bysûnder de troansbestiging fan de Nitro fraksje de benzene ring.
It resultaat fan dit proses is de foarming fan Nitro ferbiningen, dy't precipitated. Dat is de basis funksje ksantoproteinovaya reaksje.
Wat bepaald it amino acid
Net alle aminocarboxylic acid kin opspoard mei help fan sa'n stekproef. It wichtichste skaaimerk fan ksantoproteinovaya protein detection reaksje - de oanwêzigens fan 'e benzene ring of heterocyclic ring yn it molekúl aminosoeren.
Omdat it aaiwyt wurdt isolearre út aminocarboxylic soeren twa aromatische, wêrby't der in phenyl groep (foar phenylalanine), en in hydroxyphenyl radikaal (yn tyrosine).
Mei ksantoproteinovaya reaksje wurdt bepaald heterocyclic amino acid Tryptophan, indole hawwende in aromatische kearn. De oanwêzigens fan 'e boppesteande ferbiningen yn it aaiwyt jout de karakteristike kleur feroarje fan de test omjouwing.
Wat gebrûk reagents
Foar it útfieren fan de reaksje ksantoproteinovaya nedich ta te rieden op in 1% oplossing fan it aai eiwit, of plantaardige oarsprong.
Meastal brûkt aai, dy't ferdield is foar fierdere ôfskieding fan it aaiwyt út de djerre. Foar in 1% oplossing fan aaiwyt waard fertinje yn in tenfold bedrach fan suvere wetter. Nei ûntbinen fan it úteinlike aaiwyt liquid moatte wurde filtere troch ferskate lagen fan cheesecloth. Dy oplossing moat wurde opslein yn in koele plak.
It is mooglik om út te fieren it reaksje mei in griente aaiwyt. Om tariede de oplossing wurdt brûkt tarwe moal yn in bedrach fan 0,04 kg. 0.16 l fan suvere wetter. De yngrediïnten waarden mingd yn in flesse dy't bûn foar 24 oeren yn in koele plak by in temperatuer fan sa'n + 1 ° C. Oan 'e ein fan de dei de oplossing waard brûst, folge troch filtration dêrfan earst mei watten en dêrnei - in papier optearde filter. It gefolch floeiber waard bewarre yn in koele plak. Dy oplossing is benammen oanwêzich yn de albumin fraksje.
Foar it útfieren fan de reaksje ksantoproteinovaya as de wichtichste reagent brûkt nitric acid conc. Fierdere reagents is in oplossing fan 10% sodium hydroxide of ammoniak, de gelatine oplossing en unconcentrated phénol.
De metodyk fan de
Yn in skjinne buis wurdt makke 1% aaiwyt oplossing Âldtsjerk aaien of moal yn in bedrach fan 2 ml. Om dit wurdt tafoege likernôch 9 drippen fan konsintrearre nitric acid nei flocculation stoppe. It gefolch mingsel waard ferwaarme, gefolch giele neerslag stadichoan ferdwynt en syn kleur giet yn oplossing.
As de floeistof koelt del yn 'e buis lâns de muorre tafoege likernôch 9 drippen fan natrium hydroxide, konsintrearre, dat is tefolle foar it proses. De reaksje medium wurdt alkaline. Ynhâld wurdt oranje kleur yn de test buis.
skaaimerken fan
Sûnt ksantoproteinovaya neamd kwalitative reaksje oan nitric soere troch de aksje fan de aaiwiten, de stekproef wurdt útfierd ûnder opnaam fume kape. Observearjen alle feilichheid foarsoarchsmaatregels doe't wurkjen mei konsintrearre caustic stoffen.
It frijmeitsjen fan de ynhâld fan de buis kin him foardwaan by de ferwaarming proses dat moat beskôge wurde as fixing it yn in hâlder en selektearjen e oanstriid.
Dialling of konsintrearre nitric acid en caustic soda moatte allinne mei help fan in glêzen pipette en peren rubber ferbean pipette troch mûle.
Relative reaksje mei phénol
Foar de dúdlikens, proses en befêstiging fan 'e oanwêzigens fan' e phenyl groepen wurdt útfierd mei in lyksoartige sample hydroxybenzene.
De buis making 2 ml verdund phénol, dan stadichoan lâns de muorre, waard tafoege 2 ml fan konsintrearre nitric acid. De oplossing waard ûnderwurpen wurde oan ferwaarming, wêrby it wurdt giel. Dizze reaksje is de kwaliteit fan 'e oanwêzigens fan' e benzene ring.
Process hydroxybenzene nitrated mei nitric acid folge troch foarming fan in mingsel fan p-nitrophenol en o-nitrophenol yn in persintaazje fan 15 oant 35.
Ferliking test mei gelatine
Bewize dat ksantoproteinovaya reaksje oan it aaiwyt ferriedt in amino acid mei aromatische struktuer, brûk aaiwiten dy't gjin phenolic groep.
Yn in skjinne buis wurdt makke 1% gelatine oplossing yn in bedrach fan 2 ml. Om dit wurdt tafoege likernôch 9 drippen fan konsintrearre nitric acid. It gefolch mingsel is ferwaarme. De oplossing waard net kleure yn giel, dat bewiist de ôfwêzigens fan de aminosoeren mei in aromatische struktuer. Soms is der in lichte yellowing fan it miljeu fanwege de oanwêzigens fan proteïne ûnreinheden.
gemyske fergelikingen
Yn de twa stap reaksje rint ksantoproteinovaya aaiwiten. Formule earste etappe nitration proses beskriuwt amino acid molekulen mei help konsintrearre nitric acid.
In foarbyld is it taheaksel fan it Nitro fraksje de tyrosine te foarmjen nitrotyrosine en dinitrotirozina. Yn it earste gefal oan 'e benzene ring is taheakke ien NO 2 -radical, en de twadde COMPOUND hawwe twa hydrogen atomen wurde ferfongen troch NO 2. Gemyske formule ksantoproteinovaya tyrosine reaksje fertsjintwurdige troch reaksje mei nitric acid te foarmjen nitrotyrosine molecule.
Nitration proses wurdt begelaat troch oergong kleurloos kleuren yn giel toan. By de útfiering fan dizze reaksje mei aaiwiten befetsje de amino acid resten phenylalanine of Tryptophan, en kleur fan de oplossing feroarings.
De twadde stap is de reaksje produkt fan nitration fan tyrosine molekulen, benammen nitrotyrosine, mei ammonium of natrium hydroxide. It resultaat is in natrium of ammonium sâlt dêr't de giel-oranje kleur. Sa'n reaksje is besibbe oan 'e mooglikheid fan nitrotyrosine molekulen bewege yn de quinoid foarm. Dêrnei SALT foarme dêrút nitronic acid, dat hat in quinone systeem fan conjugated dûbele biningen.
Sa einiget ksantoproteinovaya reaksje oan aaiwiten. De fergeliking presintearre hjirboppe de twadde stap.
resultaten
By de analyze fan de Fluids opnommen yn de trije buizen, de ferwizing oplossing wurdt fertinne mei phénol. Stoffen mei in benzene ring jaan kwalitative reaksje mei nitric acid. Dêrtroch is it feroaret kleur fan de oplossing.
Lykas bekend, gelatine bestiet út in hydrolyzed foarm fan collagen. It aaiwyt befettet net de swietrokige struktuer fan de aminosoeren. Gjin feroaring yn kleur fan it medium troch reaksje mei in soer.
Yn de tredde test buis is der in positive reaksje oan aaiwiten ksantoproteinovaya. Konklúzje kin lutsen wurde as folget: alle aaiwiten mei aromatische struktuer, oft it ek in phenyl groep of in indole ring, jûn de feroaring yn kleur fan 'e oplossing. Dat komt troch de foarming fan Nitro ferbiningen mei in giele kleur.
It útfieren fan in kleur reaksje bewiist de oanwêzichheid fan ferskate gemyske struktueren yn aminosoeren en aaiwiten. Foarbyld gelatine docht bliken dat syn komposysje omfiemet aminocarboxylic acid net hawwen fan in phenyl groep of in Cyclische struktuer.
Mei ksantoproteinovaya reaksje kin ferklearre wurde troch yellowing fan 'e hûd as tapast op dat in sterke nitric acid. Deselde kleur sil wurde frothy molke yn har lyksoartige analyze.
Yn klinyske laboratoarium praktyk dizze kleur sample wurdt net brûkt foar it opspoaren fan aaiwyt yn de urine. Dat komt troch de giele kleur fan de urine sels.
Ksantoproteinovaya reaksje waard hieltyd mear brûkt foar quantification fan aminosoeren lykas Tryptophan en tyrosine, as ûnderdiel fan ferskate aaiwiten.
Similar articles
Trending Now