PCR analyze: wat is it? Hoe nimme de PCR analyze

It net sa lang lyn ûntwikkele in betrouber, tige gefoelige en rappe metoade foar de diagnoaze fan ferskate besmetlike sykten by minsken. Sa'n metoade hjit "PCR analyze". Wat is it, wat is syn wêzen, wat er kin identifisearje microorganisms en hoe te nimmen is, wy sille beskriuwe yn dit artikel.

Skiednis fan ûntdekking

Útfûn de polymerase ketting reaksje (PCR) is in Amerikaansk wittenskipper Keri Myullis yn 1983. Yn it earstoan, de patentierten metoade fan diagnoaze troch "Cetus Corporation," yn dêr't er wurke en syn betinker. Mar yn 1992 alle rjochten en patinten waarden ferkocht oan it bedriuw "Hoffman-La Roche." Dêrnei, it die bliken dat ferlykbere stúdzjes waarden útfierd yn parallelle en waarden meld troch oare Amerikaanske Biologen, lykas Elis Chen, David Edgar, John rre. Yn 1980 er dwaande mei dizze dei en de Sovjet wittenskippers A. Slyusarenko A. Kaledin en S. Gorodetski. Dêrom, om te bepalen de ienige auteursrjocht eigner is net mooglik west. In protte treflik biochemists hawwe bydroegen oan de ûntwikkeling fan metoaden fan polymerase reaksje en CERN patintearre harren ynnovaasjes. Op dit punt analyze fan PCR wurdt útfierd troch de spesjaal ynrjochte laboratoaria.

GEARFETTING PCR Diagnostic

PCR analyze: wat is it en hoe wurket it? De essinsje fan de metoade leit yn it feit dat troch it brûken fan in spesjale enzyme DNA polymerase yn vitro te fergrutsjen yn folume spesifike microbial omjouwing. Te dwaan dat faker as ien kear multiply beskikber DNA materiaal. Sa, de oanwêzigens fan in pathogen yn in stekproef fan it bedrach wurdt ferhege op kosten fan biochemical laboratoarium manipulaasje, en bacteriën sille net wêze dreech te spoaren yn de mikroskoop.

Hoe is de stúdzje fan it materiaal?

Om fieren de analyze fereaske:

• It DNA template;
• primers materiaal ferbinen einen fan it fragmint;
• thermostable DNA polymerase enzyme;
• chemicaliën, soargje foar goede wurking fan de enzymen;
• buffer oplossing is nedich foar it meitsjen fan de gaadlike betingsten foar de groei en it ûntwikkeljen fan DNA materiaal.

Om útfiere PCR operate 25-30 werhellet besteande út trije stappen: denaturation, annealing en boerebedriuw.

Om analysearje polimezarnoy ketting reaksje mei help fan in spesjale apparaat - cycler. Moderne apparatuer kinne jo ynstallearje de nedige ferwaarming en cooling buizen programma te heffen flaters yn de diagnoaze.

Wêr te passen de diagnose?

Polimezarnoy ketting reaksje metoade wurde brûkt yn ferskate fjilden fan de genêskunde:

• Gerechtelijke gebrûk mei te ydentifisearjen it erflik materiaal, lykas hier, flibe of bloed;
• PCR analyze fan bloed helpt te genotyping, bygelyks foar it opspoaren fan yndividuele genetyske plante nei oanlieding fan in spesifyk drug;
• troch in metoade set famyljebannen tusken de minsken;
• meast socht-PCR metoade hat wurden yn de medyske diagnoaze foar fêststellen fan ferskate besmetlike sykten.

Wat ynfeksjes ferriedt PCR?

Sa, medisyn hat lang mei sukses brûkt PCR analyze. Wat is it, ha wy al learden. En guon sykteferwekkers kinne wurde opspoard mei? PCR diagnose folgjende infecties :

• hepatitis A, B, C;
• ureaplasmosis;
• candidiasis;
• chlamydia;
• mycoplasmosis;
• baktearjele vaginosis;
• besmetlike mononucleosis;
• trichomoniasis;
• HPV ynfeksje;
• tuberkuloaze;
• herpes ynfeksje fan de 1e en de 2e type;
• Helicobacter pylori ynfeksje;
• cytomegalovirus;
• diftery;
• salmonellose;
• Hiv ynfeksje.

Ek, PCR metoaden wurde brûkt yn de diagnoaze fan kanker.

foardielen fan de metoade

Diagnostic PCR hat ferskate foardielen:

1. Hege gefoelichheid. Ek mei mar in pear DNA molekulen microorganism PCR analyse bepaalt de oanwêzigens fan ynfeksje. It helpt metoade foar gronyske en latinte sykten foardogge. Faak yn sokke gefallen, de microorganism is uncultivated yn oare wizen.
2. Om te ûndersykjen gjin gaadlik materiaal, lykas flibe, bloed, seksuele seleksje, hier, epithelial sellen. De meast foarkommende is in bloed test en urogenital swab PCR.

3. Net easkje in ferlingd groeiende kultueren. It automatisearre proses fan de diagnostyk kinne te krijen resultaten fan in stúdzje nei 4-5 oeren.
4. De metoade is hast hielendal autentyk. Opnommen allinne isolearre gefallen fan falske-negative resultaat.
5. Mooglikheid om te identifisearjen ferskate soarten sykteferwekkers yn ien sample materiaal. Dat net allinne mei faasje op it proses fan de diagnoaze fan de sykte, mar ek gâns ferminderet materiaal kosten. Faak hat de dokter prescribes in wiidweidige analyse fan de PCR. Priis survey, besteande út it fêststellen fan 'e seis sykteferwekkers, is sa'n 1.500 roebel.

Oanbefellings op tarieding op analyse

De resultaten te wêzen jildich de PCR stúdzjes moatte hifke wurde, nei oanlieding fan de oanrikkemedaasjes fan 'e foarriedige de tariedings foar de diagnose:

1. Foardat oplevering fan de flibe moat ûnthâlde harren fan iten en drug foar 4 oeren foarôfgeand oan sampling fan it materiaal. Fuortendaliks foar de proseduere, spoel dyn mûle mei sean wetter.
2. It boppesteande regels moatte wurde begelaat en doe't nimme de stekproef út 'e binnenkant fan' e wang. Na het spoelen is oan te rieden om te fieren út in ljocht massage op 'e hûd te loslitte prostatic secretions.
3. Urine wurdt meastal sammele thús. Om do dit, moatte jo fiere in yngeande húske fan geslachtsdielen. Yn in sterile plestik container is nedich om te sammeljen 50-60 ml fan urine. It rieden foar froulju ynfoegje it tampon yn de fagina, en minsken safolle as mooglik te lûken de hûd fold te garandearjen de suverens fan it materiaal. Jo kinne gjin nimme it materiaal ûnder menses.
4. Foar besoarging fan sperma ûnthâlding fan geslachtsferkear yn de 3 dagen foarôfgeande oan de kolleksje fan materiaal. Ek, dokters wurde advisearre om ferlitte it brûken fan 'e sauna en waarm bad, alkohol en pittich Foods. Foar 3 oeren foarôfgeand oan analyze is nedich om ûnthâlde harren fan urinating.
5. Om foarby de urogenital smeer, bygelyks, as de analyze op in chlamydia PCR, beide froulju en manlju is oan te rieden dat seksuele rest foar 3 dagen. 2 wiken foar de analyze kin net nimme antibiotika. Foar in wike jo moatte ophâlde mei it brûken fan de yntime gels, salve klear, vaginale zetpillen, douching. 3 oeren foarôfgeand oan it ûndersyk moatte ûnthâlde harren fan urinating. Under menstruaasje fence materiaal wurdt net útfierd, mar 3 dagen neidat it opsizzen fan Spotting kin nimme urogenital smeer.

PCR in pregnancy

It wachtsjen perioade foar in poppe, in protte besmetlike sykten, seksueel oerdraachbere sykten, binne tige gefaarlik foar normale foei ûntwikkeling. SOO kinne, oansette intrauterine ûntwikkeling, miskream of iere berte, oanberne malformations fan it bern. Dêrom is it wichtich om te krijen yn begjin swierens screening PCR. Pass analyse is nedich Atst dy ynskriuwst - maksimaal 12 wiken.

Fence materiaal komt fan 'e cervical grêft mei in spesjale borstels. De proseduere is Kvarntorp en foarmet gjin gefaar foar de poppe. Normaal yn de swierens analysearre foar Chlamydia PCR metoade, likegoed as ureaplasmosis, mycoplasmosis, cytomegalovirus, herpes, papillomavirus. Sa'n examination kompleks neamd PCR 6.

PCR foar de diagnoaze fan hiv

Fanwege it feit dat de wize fan polymerase ketting reaksje is tige gefoelich is foar feroarings yn it lichem en de betingsten fan de diagnoaze, in protte faktoaren kinne ynfloed ha op de útkomst. Dêrom PCR analyze foar hiv ynfeksje is gjin betroubere metoade, syn effisjinsje - 96-98%. De oare 2-4% fan de test jout falske positive resultaten.

Mar yn guon situaasjes sûnder PCR diagnoaze fan HIV kin net dwaan. Meastal, it is útfierd oan minsken mei in falske-negatyf Elisa. Dy sifers jouwe oan dat de persoan noch net ûntwikkele antistoffen oan it firus en kin net fûn sûnder it fergrutsjen fan it tal meardere. Dat dit kin berikt wurde troch it fieren fan in bloed test PCR metoade.

Ek nedich is in diagnoaze fan bern earste jier fan it libben, berne oan HIV-posityf memmen. De metoade is de ienige manier om betrouber bepale de status fan it bern.

PCR foar de diagnoaze fan hepatitis

Polymerase ketting reaksje metoade lit opspoaren fan DNA fan it firus fan hepatitis A, B, C, goed foar de foarming fan antistoffen oan de ynfeksje of symptoom onset. Benammen effektyf is de PCR analyze op hepatitis C, sûnt 85% fan sokke sykte binne asymptomatic en sûnder op 'e tiid behanneling wurdt groanyske.

Tidige opspoaren fan de pathogen sil helpe kommen dat komplikaasjes en lange-termyn behanneling.

Integrated PCR screening

Yntegraal PCR Analysis: wat is it? Dit screening metoade polimezarnoy ketting reaksje dy't omfiemet bepalen tagelyk ferskate soarten ynfeksje: Mycoplasma genitalium, Mycoplasma hominis, Gardnerella vaginalis, Candida, trichomonas, cytomegalovirus, ureaplasma urealitikum, herpes 1e en 2e type, gonorrhea papillomavirus. De priis fan dy diagnose farieart fan 2000 oant 3500 roebel. ôfhinklik fan it konsultaasjeburo, materialen en apparatuer, en ek op it type fan 'e analyze: kwalitatyf of kwantitative. Wat is nedich yn jo gefal - de dokter beslút. Yn guon gefallen, do krekt gewoan ûntdekke de oanwêzigens fan 'e pathogen yn oaren, lykas HIV, de wichtige rol spile troch kwantitative titer. oantsjutten as "PCR analyse fan 12" yn de diagnoaze fan alle boppesteande sykteferwekkers eksamen.

Deciphering de analyze resultaten

Transkripsje PCR analyze is sljochtwei. Der binne mar 2 yndeks skaal - "posityf" en "negatyf." Op opspoaren fan de pathogen kin dokters mei 99% betrouwen Âldtsjerk befêstiget de oanwêzigens fan 'e sykte en te begjinnen behanneling fan de pasjint. Yn de kwantitative metoade fan it fêststellen ynfeksje yn in soartgelikense kolom yndeks tal detektearre baktearjes wurdt oantsjutte. Allinne in dokter kin bepale de omfang fan 'e sykte en schrijven de nedige behanneling.

Yn guon gefallen, bygelyks by it fêststellen fan HIV ynfeksje troch PCR, mei in negatyf resultaat, is der ferlet fan ekstra ûndersiken te befêstigjen dizze sifers.

Wêr om testen?

Wêr pass-PCR analyze yn de iepenbiere clinic of in privee laboratoarium? Spitigernôch, yn 'e gemeentlike medyske ynstellings apparatuer en metoaden wurde faak ferâldere. Dêrom is it better om te jaan foarkar ta privee laboratoaria mei moderne apparatuer en sterk kwalifisearre personiel. Boppedat, yn in privee klinyk jo krije de resultaten folle hurder.

Yn Moskou, in soad privee laboratoariums biede PCR analyze foar ferskate ynfeksjes. Bygelyks, yn sokke clinics as "Vita", "Integrated Clinic," "Happy Family", "Uro-Pro", útfierd PCR analyze. Enkête priis is 200 roebel. foar it fêststellen fan in pathogen.

It kin konkludearre wurde dat de diagnoaze fan de besmetlike sykten troch PCR yn de measte gefallen is in flugge en betroubere wize fan detecting de pathogen yn it lichem oan 'e earste fazen fan ynfeksje. Lykwols, yn beskate gefallen, om te kiezen oare metoaden fan de diagnoaze. Bepale de needsaak fan sa'n stúdzje kin allinnich wêze in spesjalist. PCR analysis ûntsiferjen ek ferget in profesjonele oanpak. Folgje jo dokter syn advys en net jouwe har eigen testen, dy't net nedich.